Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 2:43 мин. • July 8th, 2025
Белок-фосфолипидные взаимодействия на клеточной мембране имеют решающее значение для регуляции нескольких клеточных процессов.
Чтобы обнаружить целевые белок-фосфолипидные взаимодействия in vitro с помощью количественной проточной цитометрии, возьмите пробирку, содержащую в буфере желаемую концентрацию имитации клеточной мембраны — микронных меченых липофильными красителями фосфолипидных везикул.
Добавьте в раствор соответствующую концентрацию различных флуоресцентно меченных целевых белков.
Введите суспензию в проточный цитометр. Установите параметры жидкостной системы на низкую скорость потока, чтобы обеспечить достаточное время для белок-фосфолипидных взаимодействий.
По мере того, как флуоресцентно меченые белки и фосфолипидные везикулы взаимодействуют в проточном канале, концентрация белков, связанных с везикулами, увеличивается.
Когда эти комплексы проходят через лазерные лучи от определенных флуоресцентных каналов, обеспечивающих соответствующие длины волн, они возбуждаются. Эти возбужденные белки и фосфолипидные везикулы в комплексе при релаксации до основного состояния излучают соответствующие флуоресцентные сигналы, которые улавливаются соответствующими детекторами.
Обнару
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео