Биопанирование на основе кварц-кристаллических микровесов на основе биосенсора для изучения белок-лекарственных взаимодействий
Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 5:13 мин. • July 8th, 2025
Чтобы изучить взаимодействие белка и лекарства, начните с кварц-кристаллических микровесов (QCM), сенсорного чипа, состоящего из пьезоэлектрического керамического материала, покрытого тонким слоем золота, выступающим в роли электрода.
Наложите на электрод раствор испытуемого препарата, образуя равномерный слой.
Вставьте чип датчика в аппарат СМК. Погрузите его в буферную кювету. Подайте действие электрического поля, заставляя керамические кристаллы колебаться с фиксированной частотой в зависимости от массы молекул лекарства на сенсорном чипе.
Добавьте библиотеку фагов Т7, содержащую смесь генетически модифицированных фагов, отображающих пептидные варианты, слитые с капсидным белком фагов. Фаги, отображающие специфический пептид, связываются с молекулами лекарств с высоким сродством и иммобилизуются на сенсорном чипе. Это панорамирование фагов Т7 увеличивает массу на сенсорном чипе, что приводит к уменьшению колебаний кристалла с течением времени.
После уравновешивания перенесите связанный с фагом сенсорный чип во влажную чашку Петри. Обложите чип бактериальным раствором и инкубируйте. Фаги заражают бактерии и размножаются, производя специфические пептиды-экспрессирующие фаги, котор
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео