Биомембранный силовой зонд для количественного определения рецептор-лигандных взаимодействий

Взаимодействие между Т-клеточным рецептором, TCR, и антигенным пептидом, представленным MHC, или главным комплексом гистосовместимости, на антигенпрезентирующей клетке, APC, заставляет Т-клетку оказывать механическое воздействие на APC. Это явление необходимо для активации Т-клеток.

Чтобы количественно оценить взаимодействия рецептор-лиганд с помощью биомембранного силового зонда, BFP, начните с пользовательской клеточной камеры на основе предметного стекла. Поместите камеру клетки под микроскоп.

Введите в камеру суспензии биотинилированных набухших эритроцитов, стеклянные шарики зонда, покрытые пептид-связанными комплексами MHC-стрептавидин-биотин, и Т-клетки. Расположите зонд, мишень и микропипетки, заполненные вспомогательным буфером, вокруг камеры.

Отасуньте биотинилированный эритроцит с помощью дозаторной пипетки, расположив его в пустой зоне. Аспирируйте Т-клетку с помощью целевой микропипетки, расположив ее справа от эритроцитов. Отсадите шарик зонда с помощью вспомогательной микропипетки и прикрепите его к вершине эритроцита. Стрептавидин шарика связывается с биотином эритроцитов и образует силовой зонд.

Выровняйте Т-клетку с силовым зондом, чтобы позволить TCR взаимодейств