Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:08 мин. • July 8th, 2025
Тучные клетки — специализированные белые кровяные тельца, содержат секреторные гранулы, богатые лизосомальными ферментами, такими как бета-гексозаминидаза.
Чтобы выполнить дегрануляцию тучных клеток — процесс, предполагающий высвобождение секреторных гранул, начинают с многолуночного планшета, содержащего суспензию мышиных перитонеальных тучных клеток, предварительно обработанную иммуноглобулинами.
Обработайте клетки целевым химическим веществом. Целевое химическое вещество со стимулирующим потенциалом взаимодействует с предварительно связанными иммуноглобулинами на специфических рецепторах тучных клеток. Это активизирует перемещение гранул, содержащих бета-гексозаминидазу, к поверхности клетки, высвобождая ее в раствор.
Центрифугируйте планшет для гранулирования клеток и перенесите содержащую фермент надосадочную жидкость в пустую лунку свежей пластины. Обработайте клеточные гранулы буфером для лизиса, чтобы лизировать клетки и высвободить их содержимое в лизат, включая внутриклеточную бета-гексозаминидазу.
Добавьте ферментсодержащий лизат в другую лунку того же многолуночного планшета. Обработайте обе лунки субстратом фермента,-нитрофенил-ацетил-D-глюкозамином, и инкубируйте. Фер
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео