Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:56 мин. • July 8th, 2025
Взрослые соматические клетки могут быть генетически перепрограммированы для получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, iPSCs, которые проявляют недифференцированные и пролиферативные состояния, подобные стволовым клеткам.
Чтобы дифференцировать ИПСК человека в макрофаги — белые кровяные тельца, которые фагоцитируют патогены и клеточный мусор — начинают с культивальной пластины с неклеточной адгезивной поверхностью.
Добавьте среды, содержащие факторы роста, костный морфогенетический белок, фактор стволовых клеток и фактор роста эндотелия сосудов. Засейте ИПСК и инкубируйте.
Неадгезивная поверхность предотвращает прикрепление iPSC и поддерживает клетки во взвешенном состоянии, способствуя агрегации в трехмерные эмбриоидные тела, EB. Факторы роста инициируют дифференцировку иПСК внутри БЭ в клетки мезодермальной линии.
Перенесите дифференцированные БЭ в центрифужную пробирку. Дайте им осесть под действием силы тяжести. Ресуспендируйте БЭ в свежих средах, содержащих интерлейкин-3, IL3 и макрофагальный колониестимулирующий фактор, CSF1. Поместите БЭ на пластину для клеточных культур, покрытую желатином.
Желатин — белок внеклеточного матрикса — способствует прикреплению БЭ
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео