Выделение лимфоцитов из пейеровского пятна мыши

Пейеровы пластыри, ПП, агрегаты организованных лимфоидных тканей в стенке тонкой кишки, содержат иммунные клетки, включая В-лимфоциты, Т-лимфоциты, дендритные клетки и макрофаги.

Чтобы выделить лимфоциты из ПП мыши, начните с усыпленной мыши. Надрезать брюшную стенку, обнажая брюшную полость. Найдите слепую кишку. Рассеките илеоцекальное соединение, чтобы отделить слепую кишку от тонкой кишки.

Иссеките брыжейку и разрежьте тонкую кишку в области двенадцатиперстной кишки, чтобы удалить тонкую кишку из брюшной полости. Поместите тонкую кишку в многолуночную пластину, содержащую охлажденную среду, и промойте, чтобы удалить мусор.

Расположите тонкую кишку брыжеечной стороной вниз и увлажните средой для поддержания гидратации тканей. Определите ПП — белые многодольчатые агрегаты на антибрыжеечной стороне стенки кишечника.

Тщательно иссекайте ПП, исключая окружающую кишечную ткань. Переложите в пробирку со средой. Инкубируют при постоянном перемешивании. Эта стадия перемешивания отделяет слизь, клеточный мусор и любые фекальные массы от ПП, тем самым улучшая восстановление лимфоцитов ПП.

Далее переложите ткань в клеточное ситечко с подходящим размером ячеек. Аккуратно разрушайте ПП и выс