Генерация in vitro плазмоцитоидных дендритных клеток из общих лимфоидных предшественников

Плазмоцитоидные дендритные клетки, или pDCs, являются иммунными клетками, которые реагируют на инфекцию, вырабатывая интерферон цитокина I типа.

Для получения pDC in vitro принимают суспензию общих лимфоидных клеток-предшественников, или CLP, выделенных из костного мозга мыши. CLP могут дифференцироваться в лимфоциты и дендритные клетки.

Добавьте клеточную суспензию на слой фидерных клеток — адгезивных стромальных клеток — облученных гамма-лучами, чтобы подавить пролиферацию. Фидерные клетки обеспечивают цитокины и межклеточный контакт, необходимые для дифференцировки CLP.

Добавьте адекватную концентрацию Fms-подобной тирозинкиназы 3 лиганда, или FL — бивалентного цитокина, который способствует развитию pDC — и инкубируйте.

CLP мигрируют между фидерными клетками и разрастаются, образуя группы клеток, называемые булыжными участками.

FL в этой среде связывается с рецептором Flt3 — рецептором тирозинкиназы — на CLP. Связывание индуцирует димеризацию рецепторов и аутофосфорилирование остатков тирозина на цитоплазматическом домене.

Цитоплазматические адаптерные белки связываются с этими остатками и фосфорилируются, передавая сигнал нижестоящим сигнальным компонентам. Сигнальный каскад в