Культивирование активированных Т-клеток из мононуклеарных клеток периферической крови человека

Множественные взаимодействия рецептор-лиганд между наивными Т-клетками и антигенпрезентирующими клетками, АПК, вызывают активацию и пролиферацию Т-клеток.

Два основных события в этом процессе включают распознавание антигена, экспрессируемого APC, комплексом рецепторов CD3-T-клеток, с последующим взаимодействием между лигандом B7, экспрессируемым APC, и рецептором CD28 Т-клеток.

Для изучения активации и пролиферации Т-клеток in vitro берут мононуклеарные клетки периферической крови человека, PBMC, суспендированные в подходящей питательной среде. Добавьте магнитные шарики, покрытые анти-CD3 и анти-CD28 антителами, и разделите клетки на две конические трубки.

Добавьте цитокин интерлейкин-2, ИЛ-2, в первую пробирку и интерлейкин-15, ИЛ-15, в другую. Перенесите ячейки в многолуночный планшет. Инкубировать.

Анти-CD3 и анти-CD28 антитела гранул связываются с комплексом рецепторов CD3-Т-клеток и рецептором CD28, экспрессируемыми на Т-клетках, соответственно, вызывая активацию и пролиферацию Т-клеток.

С IL-2 цитокин связывается со своим рецептором на поверхности активированных Т-клеток, что приводит к его дифференцировке и пролиферации в эффекторные Т-клетки. И наоборот, IL-15 в первую очер