Трехмерная культуральная система тимуса для получения тимусовых эмигрантов, полученных из ИПСК

Для получения эмигрантов тимуса, полученных из iPSC, iTE из незрелых Т-клеток в 3D-системе культивирования органов тимуса, берут дезоксигуанозин, обработанные dGUO, фетальные доли тимуса мышей в подходящих средах.

dGUO проникает в среду тимуса и разрушает эндогенные лимфоциты тимуса, предотвращая их интерференцию с незрелыми Т-клетками, полученными из iPSC, во время совместного культивирования.

Сделайте глубокий разрез в центре каждой доли тимуса. Перенесите доли в чашку для свежей культуры, содержащую среду с добавлением факторов роста фактора стволовых клеток, лиганда FLT3 и интерлейкина-7.

Пипеткой нагнетайте

среду, содержащую доли тимуса, в лунки 3D-планшета для культивирования. Добавьте незрелые Т-клетки, полученные из iPSC. Инкубировать. Т-клетки мигрируют в доли тимуса через разрез.

В среде тимуса факторы роста FLT3 лиганд и IL-7 связываются со своими соответствующими рецепторами на незрелых Т-клетках, что приводит к активации факторов транскрипции и экспрессии определенных генов.

Следовательно, незрелые Т-клетки претерпевают ряд изменений и приобретают определенные характеристики, в конечном итоге созревая в CD8αβ+ Т-клетки, которые экспрессируют молекулы CD8, Т-клеточные р