Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:58 мин. • July 8th, 2025
После повреждения сосудов тромбоциты рекрутируются и активируются в месте повреждения, образуя тромбоцитарную пробку и инициируя восстановление тканей.
Чтобы очистить тромбоциты из цельной крови мышей и активировать их in vitro, возьмите подходящую среду с градиентом плотности. Аккуратно нанесите образец крови поверх среды. Центрифуга для отделения тромбоцитов от плазмы и слоев красных и белых кровяных телец.
Переложите тромбоциты в две новые пробирки, содержащие подходящий буфер для окрашивания. Добавьте синтетический тетрапептид GPRP, содержащий аминокислотную последовательность глицин-пролин-аргинин-пролин, в одну пробирку, а затем тромбин.
Тромбин расщепляет специфические внеклеточные домены тромбиновых рецепторов тромбоцитарной поверхности, инициируя нисходящий сигнальный каскад и активируя тромбоциты. Гранулы активированных тромбоцитов высвобождают белок CD62P, который быстро перемещается на поверхность мембраны.
Тетрапептид GPRP блокирует фибриноген — гликопротеин, который связывается с мембранным интегрином CD41/CD61 на активированных тромбоцитах, инициируя агрегацию тромбоцитов, тем самым поддерживая активированные тромбоциты в суспензии.
Добавьте флуоресцентно меченные ан
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео