Метод выделения первичных тучных клеток из брюшинной полости мыши

Тучные клетки — белые кровяные тельца, содержащие цитоплазматические гранулы, заполненные медиаторами воспаления — играют важную роль во врожденных и адаптивных иммунных реакциях.

Чтобы изолировать тучные клетки соединительнотканного типа из брюшной полости — заполненного жидкостью пространства, в котором находятся органы брюшной полости, — используют усыпленную мышь, зафиксированную в лежачем положении. Сделайте продольный разрез до грудины, обнажив брюшную стенку.

Брюшная полость находится под брюшной стенкой и содержит жидкость, в которой находятся несколько иммунных клеток, включая макрофаги, лимфоциты, полиморфноядерные лейкоциты и тучные клетки.

Чтобы изолировать клетки с помощью перитонеального лаважа — аспирации внутрибрюшинного содержимого — введите ледяную питательную среду в брюшную полость без перфорации органов, избегая утечки крови. Холодная среда помогает поддерживать жизнеспособность клеток.

Осторожно встряхивайте мышь в течение достаточного времени, смешивая иммунные клетки со средой. Введите в полость пустой шприц. Медленно отсасывайте среду, восстанавливая большую часть введенной жидкости для лучшего выхода клеток.

Переложите клеточную суспензию в пробирку для сб