Метод диссекции для забора подколенных дренирующих лимфатических узлов у мышей для визуализации ex vivo

Лимфатический узел — это вторичный лимфоидный орган яйцевидной формы, присутствующий по всему телу, который функционирует в соединении врожденных и адаптивных иммунных реакций, обеспечивая взаимодействие между иммунными клетками.

Чтобы изолировать мышиный подколенный дренирующий лимфатический узел — узел, который получает лимфу от задних лап — начните с усыпления мыши, закрепленной на сцене в положении лежа.

Подготовьте мышь, нанеся минеральное масло на икроножную область задних лап. Масло предотвращает отложение шерсти вокруг места хирургического разреза во время удаления кожи.

Сделайте разрез по средней линии от пятки до колена в области икр. Отделите кожу от нижележащей мускулатуры и обнажите подколенную ямку — неглубокое углубление за коленным суставом.

Подколенный дренажный лимфатический узел выглядит как полупрозрачная сфера внутри ямки, встроенная в жировую ткань ямки. Удалите лимфатический узел и поместите его в чашку для посева.

Затем осторожно удалите жировую ткань, окружающую узел, чтобы помочь в визуализации под микроскопом. Накройте орган абсорбирующей простыней, смоченной в соответствующем буфере. Буфер помогает поддерживать уровень гидратации для сохранения жизнеспособности тканей.

Подколенный дренирующий лимфатический узел готов к последующим визуализирующим исследованиям ex vivo.

Для забора подколенных дренированных лимфатических узлов нанесите минеральное масло на теленка и колено с инъекционной стороны животного. Далее сделайте разрез по средней линии в области икры от пятки до колена, и диссоциируйте мускулатуру икры от кожи.

Обнажите подколенную ямку. Подколенный лимфатический узел будет выглядеть как полупрозрачная сфера внутри ямки. Затем удалите лимфатический узел с помощью микрохирургических изогнутых щипцов.