Способ индуцирования воспаления глазной поверхности на мышиной модели

Система глазной поверхности включает роговицу, конъюнктиву и связанную с ними сеть желез. Слезная пленка защищает поверхность глаза.

Испарение водного слоя слезной пленки тормозится липидным слоем, выделяемым мейбомиевыми железами. Воспаление поверхности глаза препятствует секреции липидов, что приводит к болезни сухого глаза.

Чтобы вызвать воспаление глазной поверхности у мышиной модели, возьмите мышь и введите раствор иммуногена внутрибрюшинно. Иммуноген активирует Т-хелперы, или Т-клетки, чтобы вызвать иммунный ответ. Активированные клетки распространяются в глаза через системный кровоток.

После инкубации проведите воздействие, воздействуя на глазную поверхность, нанося иммуноген на глаз, вызывая преувеличенный иммунный ответ.

Антигенпрезентирующие клетки представляют иммуноген активированным Т-клеткам. Рестимуляция Т-клеток вызывает высвобождение цитокинов и хемоаттрактантов, что приводит к воспалению поверхности глаза.

Хемоаттрактанты вызывают приток нейтрофилов. Связывание с цитокинами активирует сигнальный каскад внутри нейтрофилов, генерируя активные формы кислорода или АФК. Образующиеся АФК вызывают высвобождение антимикробных белков из цитоплазматических гранул и деконденсацию хроматина.

Деконденсированные волокна хроматина и гранулированные белки образуют внеклеточную паутинистую структуру, называемую агрегированной внеклеточной ловушкой нейтрофилов или aggNET. Чрезмерная выработка aggNET закупоривает отверстия мейбомиевых желез, препятствуя секреции липидов.

Мышиная модель воспаления глазной поверхности готова к последующему анализу.

Чтобы выполнить внутрибрюшинное введение раствора иммуногена, мягко держите самку мыши C57 Black 6 в возрасте от 7 до 9 недель без анестезии за хвост, сжимая сетку клетки. Затем крепко зажмите кожу сзади и в области шеи между большим и указательным пальцами и прижмите хвост и нижние конечности между безымянным и мизинцем к ладони. Удерживая мышь неподвижно головой вниз, введите 100 микролитров приготовленного раствора иммуногена в правый или левый квадрант нижней брюшной полости.

Чтобы провести поверхностную работу с глазами после иммунизации, нанесите 5 микролитров овальбумина, или яйцеклетки, или физиологического раствора на глаз мыши, находящейся под наркозом, и подождите 5 минут, чтобы капля впиталась глазом. Далее соберите глазной экссудат, нанеся 50 микролитров стерильного физиологического раствора на глаз сразу после провокационной провокации.