Активация В-клеток на покровном стекле, покрытом антигеном

0 просмотров2:41 мин • July 8th, 2025

Активация В-клеток включает в себя распознавание антигенов рецепторами В-клеток, BCR, на их поверхности, чтобы вызвать иммунный ответ.

Чтобы изучить активацию В-клеток in vitro, начните с покровного стекла, содержащего антигены и антитела против CD45R, иммобилизованного на полимерном материале. Отрицательно заряженные антигены и антитела взаимодействуют с положительно заряженными полимерами на покровном стекле посредством электростатических взаимодействий.

Накройте покрытые покровные стекла средой, содержащей В-клетки, и инкубируйте. CD45R — трансмембранный белок В-клеток — взаимодействует с иммобилизованными антителами, способствуя клеточной адгезии.

BCR на адгезивной В-клетке взаимодействуют с антигеном, образуя иммунный синапс — координационную область для клеточной сигнализации и интернализации антигена. Это способствует ремоделированию цитоскелета и инициирует распространение клеток, что увеличивает поверхность клетки, контактирующей с антигенами.

Дальнейшее ремоделирование вызывает движение BCR-сопряженных антигенов к центру иммунного синапса. Эта клеточная перестройка вызывает смещение центросомы вблизи синаптической мембраны, которая направляет внутриклеточные органеллы, включая лизосомы, к синапсу.

Слияние лизосом с мембраной приводит к интернализации комплексов антиген-BCR. Интернализованные антигены перерабатываются в пептидные фрагменты, загружаются в основной комплекс гистосовместимости класса II или молекулы MHC и, наконец, представляются на активированных В-клетках.

Приготовьте раствор антигена, добавив анти-BCR и B220 в PBS до конечной концентрации 10 мкг/мл и 7,5 мкг/мл соответственно. Далее установите покровную крышку над крышкой из 24-луночной пластины, накрытой парафиновой пленкой, и добавьте 40 микролитров раствора антигена. Закройте пластину, а затем выдерживайте при четырех градусах в течение ночи.

Чтобы запустить активацию в coverslip, сначала промойте их PBS, и дайте им высохнуть в течение нескольких минут. Затем добавьте 150 000 В-клеток и инкубируйте при температуре 37 градусов в разные временные точки. В обоих случаях, при активации бусинами или предметными стеклами, покрытыми антигеном, мы рекомендуем начать с самого длинного временного момента, а затем переходить к более коротким.

10:26

В модели дифференциации in Vitro клеток человека обычной памяти B для долгоживущих клеток плазмы

Похожие видео

0 Просмотры

08:25

Проточная цитометрическая характеристика развития В-клеток мышей

Похожие видео

0 Просмотры

12:46

Количественная оценка и анализ В-клеток миокарда на основе проточной цитометрии

Похожие видео

0 Просмотры

04:05

Иммунофлуоресцентный анализ КТК: методика характеристики циркулирующих опухолевых клеток

Похожие видео

0 Просмотры

03:24

Динамика органелл в В-лимфоцитах после активации с помощью гранул, покрытых антигеном

Похожие видео

0 Просмотры

05:29

Методика in vitro для изучения взаимодействия Т-клеток с поддерживаемыми планарными липидными бислоями

Похожие видео

0 Просмотры

03:54

Мониторинг активации В-клеток с помощью антигенных липосом с помощью анализа кальциевого потока

Похожие видео

0 Просмотры

04:54

Оценка контролируемой активации Т-клеток с помощью фотоактивируемого пептида MHC

Похожие видео

0 Просмотры

10:31

В режиме реального времени Живая съемка Т-клеточного сигнального комплекса Формирование

Похожие видео

0 Просмотры

07:48

Пространственного и временного управления активации Т-клеток с помощью агонист Photoactivatable

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 29 августа 2026