Система культивирования кишечных органов ex vivo для изучения взаимодействия хозяина и микробиоты

Чтобы изучить взаимодействие между хозяином и кишечной микробиотой ex vivo, начните с ткани толстой кишки мыши, свободной от специфических кишечных колонизирующих бактерий. Промойте ткань средой, чтобы удалить каловые массы, и переложите в многолуночный планшет, содержащий подходящую среду.

Одновременно соберите многолуночное устройство для культивирования кишечных органов ex vivo.

Каждая лунка устройства содержит два парных входных и выходных порта, первый из которых соединяется с просветом толстой кишки, а второй обеспечивает непрерывную подачу среды в лунки для поддержания жизнеспособности тканей.

Перенесите ткань в устройство. Подсоедините проксимальный и дистальный концы толстой кишки к первой паре входных и выходных портов. Начните поступление люминального стимулятора в просвет толстой кишки, а средний поток в лунку.

Стимулятор содержит колонизирующие кишечник бактерии, которые выделяют ферменты, разрушающие слой слизи, позволяя им прикрепляться к нижележащим эпителиальным клеткам. Это активирует сигнальный каскад, который заставляет резидентные дендритные клетки расширять свои дендриты между эпителиальными клетками, захватывая бактериальные антигены и вызывая специфические и