Анализ влияния препаратов табачных изделий на продукцию цитокинов с помощью внутриклеточного окрашивания и проточной цитометрии

При взаимодействии с воспалительными стимуляторами иммунные клетки высвобождают воспалительные сигнальные молекулы — цитокины — для выработки иммунного ответа.

Для анализа влияния препаратов табачных изделий, ТПП берут многолуночный планшет с повышением концентраций ТПП. Засейте пластину мононуклеарными клетками периферической крови человека, ПБМК, содержащими иммунные клетки.

Никотин — иммунодепрессант в ТПП — связывается с никотиновыми ацетилхолиновыми рецепторами, подавляя выработку провоспалительных цитокинов. Это подавление зависит от дозы, при этом более высокие концентрации оказывают более значительный эффект.

Центрифуга для гранулирования ячеек и утилизации надосадочной жидкости, содержащей остатки ТПП.

Ресуспендируйте клетки в полноценную среду и добавьте смесь, содержащую липополисахарид — иммуностимулятор и ГольджиПлаг — ингибитор транспорта белка.

Молекулы липополисахаридов взаимодействуют с иммунными клетками, содержащими толл-подобный рецептор-4, запуская внутриклеточные сигнальные пути и выработку провоспалительных цитокинов. Между тем, молекулы GolgiPlug блокируют секрецию цитокинов из аппарата Гольджи, обеспечивая их накопление.

Зафиксируйте клетки фиксирующим раст