Метод in vitro для стимуляции лимфоцитов с помощью патогенных бактерий

Чтобы стимулировать лимфоциты с помощью Haemophilus influenzae — патогенной бактерии, принимайте суспензию изолированных мононуклеарных клеток периферической крови, или PBMC, включая лимфоциты и антигенпрезентирующие клетки или APC.

Добавьте бактериальную суспензию и инкубируйте при физиологической температуре.

Рецепторы распознавания образов на АПК связываются со специфическими компонентами бактериальных клеток, запуская фагоцитоз. Фагосома, содержащая интернализованные бактерии, сливается с лизосомой, вызывая бактериальную деградацию и переработку в пептидные фрагменты.

Молекулы главного комплекса гистосовместимости или MHC связываются с пептидными фрагментами и представляют их на поверхности клетки в виде антигенов. Т-лимфоциты связываются с представленным антигеном через Т-клеточный рецептор.

Добавьте костимулирующие антитела, которые связываются со специфическими поверхностными рецепторами на Т-лимфоцитах. Синергическое связывание индуцирует нисходящую передачу сигналов, активируя выработку цитокинов Т-лимфоцитов.

Добавьте соединение,

блокирующее Гольджи, блокирующее транспорт везикулярного белка из эндоплазматического ретикулума в Гольджи, чтобы ингибировать секрецию цитокино