Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:25 мин. • July 8th, 2025
Возьмите многолуночный планшет, содержащий макрофаги.
Добавьте Cryptococcus neoformans в тестовые лунки, в то время как контрольные лунки содержат только макрофаги.
Макрофаги, фагоцитозные грибы в фагосомах.
Промыть буфером для удаления нефагоцитированных грибков. Добавьте среды, не содержащие антибиотиков. Инкубировать.
Фагосома сливается с лизосомой, образуя фаголизосому. Грибы модулируют pH фаголизосомы и обладают внутренними механизмами выживания в суровых фаголизосомальных условиях. Грибы пронизывают фаголизосомальную мембрану и реплицируются, что сопровождается цитозольным накоплением наполненных полисахаридами везикул.
Внутриклеточное пребывание и репликация грибков вызывают повреждение клеток, запуская пути клеточной гибели. Это вызывает лизис макрофагов и высвобождение внутриклеточного содержимого, в том числе лактатдегидрогеназы или ЛДГ, в среду.
Собирайте ЛДГ-содержащие среды в разные моменты времени. Лизируйте контрольные макрофаги в одинаковые моменты времени для максимального высвобождения клеточной ЛДГ. Добавьте смесь для анализа в собранные среды и лизаты. ЛДГ превращает лактат в пируват, снижая уровень НАД+. Потоотделение восстанавливает соль тетразола, образуя кра
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео