Система лечения инфекций на основе проницаемой мембранной вставки для изучения воздействия бактериальных токсинов

Возьмите двухкамерную инфекционную систему, разделенную проницаемой мембранной вставкой. Нижний отсек содержит адгезивные кератиноциты человека, или клетки кожи.

Добавьте бактериальные патогены в верхнюю камеру, и инкубируйте. Мембрана предотвращает прямой контакт возбудителей с кератиноцитами. Патогены выделяют стрептолизин S или SLS — небольшой токсин, который проникает через мембрану и достигает клеток.

Котранспортер бикарбоната натрия на кератиноцитах опосредует приток ионов бикарбоната и натрия, поддерживая внутриклеточный рН. SLS связывается с котранспортером и нарушает транспорт ионов, что приводит к внутриклеточному осмотическому стрессу.

Индуцированная стрессом нисходящая сигнализация вызывает деградацию ингибитора, связанного с секвестрированным ядерным фактором-каппа B, или NF-κB, что приводит к его активации. Активированный NF-κB транслоцируется в ядро, что приводит к повышению продукции провоспалительных цитокинов.

При внеклеточной секреции цитокины связываются с рецепторами смерти на клетке-хозяине, инициируя некроз. После инкубации соберите надосадочную жидкость культуры, чтобы оценить воздействие бактериального токсина.

Непосредственно перед лечением используйте 1X