Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:15 мин. • July 8th, 2025
Начните с посева клеток-хозяев млекопитающих в нижний отсек проницаемой мембранной системы.
Добавьте стрептококк — патогенную бактерию, которая, как известно, выделяет стрептолизин S или токсин SLS, в мембранную вставку. Токсин SLS диффундирует через поры мембраны и достигает клетки-хозяина.
Мембранные натрий-бикарбонатные котранспортеры регулируют транспорт ионов, поддерживая клеточный гомеостаз. Токсин связывается с этими котранспортерами, нарушая транспорт ионов и вызывая осмотический стресс в клетках-хозяевах.
Это активирует несколько нисходящих сигнальных каскадов, в том числе p38 MAPK, митоген-активируемый путь протеинкиназы. Активированный p38 MAPK фосфорилирует свои последующие мишени, инициируя клеточный ответ против бактерий.
Далее снимите проницаемую мембранную вставку. Аспирируйте среду над клетками-хозяевами. Добавьте буфер для лизиса, чтобы высвободить клеточное содержимое. Центрифуга для гранулирования клеточного мусора.
Соберите надосадочную жидкость, содержащую растворимые компоненты лизата, и гранулу, содержащую нерастворимые компоненты лизата. Храните образцы для дальнейшего анализа.
Непосредственно перед лечением используйте 1X PBS для промывания клеток. Затем в
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео