Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:43 мин. • July 8th, 2025
Возьмем камеру визуализации, содержащую культуру эпителиальных клеток человека, загруженную флуоресцентным индикатором внутриклеточного кальция.
Добавьте питательную среду, содержащую ионы кальция. Введите болезнетворную бактерию шигеллу и инкубируйте.
Система бактериальной секреции проникает в клетку-хозяина и высвобождает инвазионные эффекторы. Инвазия запускает перестройку актина, образуя вокруг бактерий мембранное изъедание.
В месте инвазии активируется фосфолипаза С, или ПЛК, на плазматической мембране, и рецепторы инозитолтрифосфата группируются на эндоплазматическом ретикулуме или ЭР.
PLC гидролизует мембранный фосфатидилинозитол 4,5-бисфосфат до инозитолтрифосфата, или IP3, который накапливается локально из-за плотной актиновой сетки.
IP3 связывается с рецепторами на ER, вызывая высвобождение кальция. Индикаторы кальция связываются с высвобожденными ионами и излучают флуоресценцию, проявляя местную реакцию кальция.
IP3 медленно диффундирует через актин, еще больше истощая уровень кальция в ER и активируя кальциевый канал плазматической мембраны, что приводит к притоку кальция
.Флуоресценция в клетке указывает на задержку глобального ответа кальция.
Поместите покровное стекл
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео