Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:35 мин. • July 8th, 2025
Принимайте вирулентные и менее вирулентные штаммы золотистого стафилококка.
Добавьте сыворотку, чтобы опсонизировать бактерии.
Перенос возрастающих концентраций бактерий в охлажденные лунки с несколькими лунками, содержащими нейтрофилы. Низкие температуры препятствуют активации нейтрофилов.
Центрифуга для облегчения синхронизированного фагоцитоза.
Нейтрофильные рецепторы связываются с опсонинами, вызывая интернализацию бактерий в фагосомы.
У вирулентных бактерий фагосомная среда вызывает экспрессию цитолитических токсинов.
Эти токсины образуют поры, нарушая фагосомы и нарушая целостность мембраны нейтрофилов.
Тем не менее, менее вирулентные бактерии демонстрируют сниженную экспрессию цитолитических токсинов.
После инкубации отделите нейтрофилы и перенесите их в проточные цитометрические трубки, содержащие флуоресцентный краситель йодида пропидия (PI).
Краситель попадает в нейтрофилы с нарушенными мембранами и окрашивает ДНК.
С помощью проточного цитометра проанализируйте нейтрофилы на окрашивание ПИ.
Зависящее от концентрации увеличение доли PI-положительных нейтрофилов после фагоцитоза вирулентного штамма по сравнению с менее вирулентным штаммом указывает на цитотоксичность вируле
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео