Оценка интернализованных Porphyromonas gingivalis в эндотелиальных клетках хозяина

Во время инфекции Porphyromonas gingivalis фимбрии на анаэробных бактериях связываются со специфическими рецепторами на клетках хозяина.

Это связывание инициирует внутриклеточные сигнальные каскады, что приводит к перестройке актина и интернализации бактерий в фагосомах.

Чтобы оценить выживаемость интернализованных Porphyromonas gingivalis в эндотелиальных клетках in vitro, возьмите многолуночный планшет, содержащий эндотелиальные клетки, прикрепленные к покровным стеклам.

Добавьте суспензию Porphyromonas gingivalis. Инкубируйте для облегчения усвоения бактерий.

Удалите среду и промойте с помощью анаэробного буфера для удаления невнутренних бактерий.

Добавьте среды, содержащие антибиотики, непроницаемые для эндотелиальных клеток, для уничтожения поверхностно прикрепленных бактерий.

Инкубируйте с мягким поверхностно-активным веществом, чтобы лизировать эндотелиальные клетки, высвобождая бактерии, не вызывая их лизиса.

Разведите собранный лизат с помощью среды. Приготовьте серийные разведения лизата.

Нанесите разведения на кровяные агаровые пластины. Инкубация в анаэробных условиях, чтобы Porphyromonas gingivalis росла и образовывала видимые колонии.

Подсчитайте колонии, чтобы оценит