Методика оценки локализации опухолеспецифических антител in vivo

Возьмем суспензию клеток рака яичников человека. Добавьте в базальную мембрану матрицу среды, и держите на льду, чтобы избежать образования геля.

Загрузите смесь в шприц и введите подкожно в атимическую нюдовую мышь. Удалите иглу после того, как матрица пройдет гелеобразование, не допуская вытеснения смеси.

Отсутствие иммунного ответа у иммунодефицитной мыши сохраняет жизнеспособность введенных клеток. Белки внеклеточного матрикса геля и факторы роста обеспечивают сигналы, способствующие росту, способствуя образованию опухолей.

Опухолевые клетки сверхэкспрессируют поверхностно связанный рецептор фолиевой кислоты альфа-1, или FOLR1.

Принимайте антитела, специфичные для FOLR1. Добавьте флуоресцентный краситель и инкубируйте, обеспечивая конъюгацию красителя с антителами.

Внутривенно введите меченые антитела мыши, несущей опухоль под наркозом.

Антитела достигают опухоли через циркуляцию и связываются с FOLR1 на опухолевых клетках, флуоресцентно помечая поверхность клетки.

Выполнение флуоресцентной визуализации in vivo. При возбуждении краситель испускает флуоресценцию, облегчая оценку локализации антител в опухоли.

Диализуйте 0,5 миллилитра антитела с помощью диализной кассеты в 1 лит