Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 5:27 мин. • July 8th, 2025
Возьмите культуру раковых клеток с флуоресцентно мечеными цитоплазматическими белками.
Добавьте цитокин-индуцированные киллеры или CIK — эффекторные Т-клетки с естественными характеристиками киллеров, обладающие противоопухолевой активностью.
Рецепторы D или NKG2D группы естественных киллеров группы 2 на клетках CIK связываются со стресс-индуцируемыми белками на раковых клетках.
Связывание индуцирует клетки CIK высвобождать токсины цитоплазматических гранул — перфорины и гранзимы.
Перфорины образуют поры в мембране раковых клеток, обеспечивая проникновение гранзимов, которые активируют каспазы, вызывая апоптоз.
После инкубации соберите клетки. Добавьте флуоресцентный краситель для обеспечения жизнеспособности клеток, связывающий нуклеиновые кислоты.
Краситель проникает через поврежденную клеточную мембрану и связывается с ДНК, в результате чего образуются мертвые клетки с двойным окрашиванием.
Благодаря интактной клеточной мембране живые клетки непроницаемы для красителя.
Пропустите клетки через проточный цитометр, чтобы обнаружить живые клетки с одиночной флуоресценцией и мертвые клетки с двойной флуоресценцией.
Создайте точечную диаграмму для измерения процента мертвых раковых кл
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео