Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:25 мин. • July 8th, 2025
В раковом микроокружении активированные нейтрофилы высвобождают нейтрофильные внеклеточные ловушки, или НВЛ, состоящие из волокон внеклеточной ДНК, гистонов и гранулированных белков, которые играют решающую роль в прогрессировании рака.
Для изучения адгезии раковых клеток к НВЛ in vitro добавляйте суспензию НВЛ в лунки с несколькими лунками. Инкубируйте для формирования монослоя NET.
После инкубации удалите неприкрепленные НВЛ.
Добавьте белковый раствор, чтобы заблокировать свободные участки связывания в лунках.
Пипетка флуоресцентно меченые раковые клетки поверх монослоев NET.
Специфические поверхностные рецепторы на раковых клетках взаимодействуют с НВЛ, способствуя клеточной адгезии.
После инкубации хорошо отбракуйте среды от отрицательного контроля.
Добавьте дезоксирибонуклеазу для разрушения НВЛ, отсоединяя клетки.
Удалите растворы из отрицательных контрольных и испытательных скважин. Используйте буфер для удаления неадгезивных клеток.
Закрепите адгезивные раковые клетки к НВЛ с помощью формальдегида.
С помощью флуоресцентного микроскопа визуализируйте флуоресцентные раковые клетки, прикрепленные к НВЛ.
Тестовые лунки демонстрируют значительную адгезию раковых клеток к НВЛ, в
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео