Процедура обрезки хвоста мыши для забора периферической крови и выделения плазмы

Поместите мышь в продезинфицированную камеру, чтобы обеспечить доступ к ее хвосту.

Закрепите камеру, чтобы свести к минимуму движение мыши.

Простерилизуйте хвост и обезболите его.

С помощью острых хирургических ножниц отрежьте небольшой участок от кончика хвоста мыши, который содержит сеть кровеносных сосудов.

Эта процедура обрезания хвоста позволяет собрать небольшой объем периферической крови.

Соберите кровь в гепаринизированную капиллярную трубку, используя капиллярное действие трубки. Гепаринизированная трубка помогает предотвратить свертывание крови.

С помощью шприца с колбом переведите кровь в трубку с покрытием ЭДТА.

Переверните пробирку для правильного смешивания крови с антикоагулянтом ЭДТА. ЭДТА связывает ионы кальция в крови, предотвращая свертывание крови.

Центрифугируйте пробирку, чтобы отделить плазму от клеток крови.

Соберите и перенесите содержащий плазму верхний слой в свежую пробирку.

Храните пробирку при более низких температурах, чтобы сохранить целостность компонентов плазмы.

Чтобы собрать образец периферической крови, сначала осторожно поместите мышь в продезинфицированный ограничитель для мелких животных и закрепите трубку, чтобы свести к минимуму движения животного.

Далее потрите хвост свежим изопропиловым спиртом с последующим нанесением крема с анестетиком для местного действия.

С помощью очень острых хирургических ножниц отрежьте примерно от 0,5 до 1 миллиметра от кончика хвоста и соберите примерно 80 микролитров периферической крови в гепаринизированные капиллярные трубки.

С помощью шприца с колбой переложите образцы крови в пробирку с маркированным калием-ЭДТА и переверните пробирку 20 раз, чтобы предотвратить свертывание крови.

После центрифугирования пробирок для сбора крови в соответствии с инструкциями производителя тщательно соберите слой плазмы и храните аликвоты при температуре минус 20 градусов Цельсия, а аликвоты — при температуре минус 20 градусов Цельсия.