Процедура обрезки хвоста мыши для забора периферической крови и выделения плазмы
JoVE Encyclopedia of Experiments
Иммунология
0 просмотров • 2:51 мин • July 8th, 2025
Поместите мышь в продезинфицированную камеру, чтобы обеспечить доступ к ее хвосту.
Закрепите камеру, чтобы свести к минимуму движение мыши.
Простерилизуйте хвост и обезболите его.
С помощью острых хирургических ножниц отрежьте небольшой участок от кончика хвоста мыши, который содержит сеть кровеносных сосудов.
Эта процедура обрезания хвоста позволяет собрать небольшой объем периферической крови.
Соберите кровь в гепаринизированную капиллярную трубку, используя капиллярное действие трубки. Гепаринизированная трубка помогает предотвратить свертывание крови.
С помощью шприца с колбом переведите кровь в трубку с покрытием ЭДТА.
Переверните пробирку для правильного смешивания крови с антикоагулянтом ЭДТА. ЭДТА связывает ионы кальция в крови, предотвращая свертывание крови.
Центрифугируйте пробирку, чтобы отделить плазму от клеток крови.
Соберите и перенесите содержащий плазму верхний слой в свежую пробирку.
Храните пробирку при более низких температурах, чтобы сохранить целостность компонентов плазмы.
Чтобы собрать образец периферической крови, сначала осторожно поместите мышь в продезинфицированный ограничитель для мелких животных и закрепите трубку, чтобы свести к минимуму движения животного.
Далее потрите хвост свежим изопропиловым спиртом с последующим нанесением крема с анестетиком для местного действия.
С помощью очень острых хирургических ножниц отрежьте примерно от 0,5 до 1 миллиметра от кончика хвоста и соберите примерно 80 микролитров периферической крови в гепаринизированные капиллярные трубки.
С помощью шприца с колбой переложите образцы крови в пробирку с маркированным калием-ЭДТА и переверните пробирку 20 раз, чтобы предотвратить свертывание крови.
После центрифугирования пробирок для сбора крови в соответствии с инструкциями производителя тщательно соберите слой плазмы и храните аликвоты при температуре минус 20 градусов Цельсия, а аликвоты — при температуре минус 20 градусов Цельсия.
Обзор
В данной статье подробно описывается метод забора образцов периферической крови у мышей путем отсечения кончика хвоста. Этот процесс обеспечивает минимальный дискомфорт для животного, позволяя при этом собрать кровь для дальнейшего анализа.
Основные компоненты исследования
Область науки
- Нейробиология
- Физиология животных
- Методы забора проб крови
Теоретические основы
- Забор периферической крови имеет решающее значение для различных биологических анализов.
- Минимизация стресса у животных во время процедур необходима для соблюдения этических норм исследований.
- Правильное обращение с образцами крови и их хранение жизненно важны для сохранения целостности проб.
- ЭДТА обычно используется в качестве антикоагулянта при сборе крови.
Цель исследования
- Описать стандартизированный метод забора периферической крови у мышей.
- Обеспечить безопасность и эффективность процедуры как для животного, так и для исследователя.
- Предоставить рекомендации по правильному обращению с образцами крови и их хранению.
Используемые методы
- Помещение мыши в продезинфицированную камеру.
- Использование хирургических ножниц для надреза хвоста и забора крови.
- Использование гепаринизированных капиллярных трубок для сбора крови.
- Центрифугирование образцов для отделения плазмы от форменных элементов крови.
Основные результаты
- Успешный сбор примерно 80 µL крови.
- Эффективное предотвращение коагуляции с использованием EDTA.
- Для сохранения целостности образцы плазмы хранились при -20 °C.
- Процедура продемонстрировала минимальный уровень стресса для животного.
Выводы
- Метод отсечения кончика хвоста является надежной техникой забора крови у мышей.
- Надлежащая стерилизация и правильное обращение с животными имеют решающее значение для качества образцов.
- Данный метод может быть адаптирован для различных экспериментальных целей в нейробиологических исследованиях.
Часто задаваемые вопросы
Практическая значимость для промышленности
Сбор периферической крови у мышиных моделей позволяет проводить фармакокинетический и фармакодинамический профилинг в доклинических исследованиях. Надежное выделение плазмы обеспечивает поиск биомаркеров и проведение анализов на взаимодействие с мишенью. Данный метод представляет собой стандартизированный, малострессовый подход к серийному отбору проб в рабочих процессах при разработке лекарственных препаратов.
Стратегическое применение в биофармацевтических исследованиях и разработках
Ранние этапы поиска и валидация мишени
- Научная ценность: позволяет измерять циркулирующие биомаркеры для подтверждения модуляции мишени in vivo.
- Практическая ценность: обеспечивает получение воспроизводимых образцов плазмы для проведения ELISA, LC-MS или мультиплексных иммуноанализов.
Скрининг и разработка анализа
- Научная ценность: Обеспечивает разработку методов анализа с использованием аутентичных матриц плазмы мыши.
- Практическая ценность: Гарантирует стабильное качество образцов для валидации высокопроизводительного скрининга.
Трансляционные и доклинические исследования
- Научная ценность: Облегчает лонгитюдный мониторинг воздействия препарата и ответа на терапию.
- Практическая ценность: Обеспечивает сопоставимость данных между различными исследованиями за счет стандартизированного сбора и хранения образцов.
Интеграция конвейеров и рабочих процессов
Данный метод является частью цикла исследований — от введения доз in vivo до биоаналитического анализа, обеспечивая оптимизацию ведущих соединений и доклиническую оценку безопасности.
- Биология открытий: позволяет соотнести связывание с мишенью с фенотипическими результатами.
- Скрининг: обеспечивает получение плазмы для контрскрининга и профилирования селективности.
- Аналитика: предоставляет стабильные образцы аналитов для количественного биоанализа.
- Трансляционные исследования: поддерживает квалификацию биомаркеров в моделях, релевантных заболеванию.
- Корпоративное повторное использование: устанавливает стандартный рабочий протокол (SOP) по сбору крови мышей, применимый для различных проектов.
Операционное и корпоративное воздействие
- Научная ценность: Снижение вариабельности фармакокинетических данных за счет стандартизации методики.
- Операционная ценность: Минимизация использования животных благодаря эффективному микроотбору проб (80 µL).
- Стратегическая ценность: Ускорение принятия решений о целесообразности дальнейшей разработки (go/no-go) на основе надежных данных об экспозиции.
- Влияние на портфель: Улучшение прогнозирования клинического переноса за счет получения высококачественных образцов плазмы.
Особенности реализации
- Обучение методам асептики и правилам обращения с животными.
- Доступ к центрифуге, микроконтейнерам и холодильному оборудованию.
- Стандартизация процедур для разных операторов и учреждений.
- Адаптация под различные линии или возраст мышей.
- Ограничение: объем образца может ограничивать количество панелей в мультиплексном анализе.
Часто задаваемые вопросы по биофармацевтике
Забор крови из боковой хвостовой вены крыс
Похожие видео
0 Просмотры
Частые проб крови кончик хвоста у мышей для оценки пульсирующего лютеинизирующего гормона
Похожие видео
0 Просмотры
Модель кровотечения при трансекции хвостовой вены у полностью обезболенных мышей с гемофилией А
Похожие видео
0 Просмотры
Выделение геномной ДНК из хвостов мышей
Похожие видео
0 Просмотры
Повторил забора крови из Вены хвост-наркоз крыс с системой сбора механотронное крови
Похожие видео
0 Просмотры
Коллекция модифицированных крови из вен хвост-наркоз мышей с системой сбора механотронное крови и линзы лупы
Похожие видео
0 Просмотры
Сбор крови через Субключичную Вену пункцию у мышей
Похожие видео
0 Просмотры
Очищение тромбоцитов от мышонка крови
Похожие видео
0 Просмотры
Модель лимфедемы мышиного хвоста
Похожие видео
0 Просмотры
Забор спинномозговой жидкости и крови из боковой хвостовой вены у крыс во время регистрации ЭЭГ
Похожие видео
0 Просмотры
Последнее обновление: 29 августа 2026