Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:43 мин. • July 8th, 2025
Возьмите пробирку, содержащую свежевзятую кровь человека, и добавьте буфер для лизиса.
Детергент в буфере проникает через клеточную мембрану, лизируя клетки и высвобождая внутриклеточные нуклеиновые кислоты, или НК, и нуклеазы.
Хаотропные агенты в буфере денатурируют нуклеазы, предотвращая деградацию НК.
Добавьте магнитные частицы стекла или MGP — магнитные частицы с кремнеземным покрытием — и тщательно перемешайте.
Низкий pH буфера протонирует диоксид кремния, создавая положительный заряд на поверхности MGP.
Отрицательно заряженные NA электростатически связываются с заряженной поверхностью, образуя комплекс NA-MGP.
Под действием магнитного поля комплексы NA-MGP собираются сбоку от трубки.
Выбросьте надосадочную жидкость, содержащую клеточный мусор и белки.
Выполните несколько этапов промывки, повторно суспендируя комплексы NA-MGP в промывном буфере, применяя магнитное поле для сбора комплексов и удаляя надосадочную жидкость с оставшимися загрязнениями.
Ресуспендируйте комплексы в буфере элюирования. Высокий pH нарушает взаимодействие NA-MGP, высвобождая NA. Элюированные NA готовы к последующим анализам.
Чтобы очистить собранную кровь от нуклеиновых кислот, снова перемешайте содерж
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео