Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 7:53 мин. • July 8th, 2025
Приготовьте предметное стекло с липидным бислоем с поддержкой, или SLB, состоящим из фосфолипидов и биотинилированных фосфолипидов.
Добавьте блокирующие белки для предотвращения неспецифических взаимодействий.
Вводят стрептавидин, который связывается с биотинилированными фосфолипидами.
Добавьте биотинилированные флуоресцентно меченые анти-CD16 антитела, которые связываются с иммобилизованным стрептавидином.
Пипетка D-биотина для предотвращения неспецифического связывания стрептавидина с клетками.
Вводите естественные киллеры, или NK-клетки. Рецепторы CD16 на этих клетках специфически связываются с SLB-связанными анти-CD16 антителами, образуя иммунологический синапс.
Это связывание запускает перестройку актина и поляризацию микротрубочек, в конечном итоге образуя микрокластеры в центре синапсов, содержащие SLB-связанные анти-CD16 антитела и рецепторы CD16.
Литические гранулы, содержащие перфорин, поляризуются и проникают через актиновые филаменты в синапсе.
Закрепите клетки. Процедите мембраны и SLB.
Добавьте флуоресцентно меченные фаллоидин и антиперфориновые антитела, которые связываются с актиновыми филаментами и перфорином соответственно.
С помощью флуоресцентного микроскопа све
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео