Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:10 мин. • July 8th, 2025
Возьмите многолуночный планшет, содержащий прецизионно вырезанные ломтики легких человека, которые поддерживают нативную микроархитектуру легких.
Удалите носитель. Добавьте в лунки возрастающие концентрации тестируемого агента и инкубируйте.
В зависимости от своего цитотоксического потенциала, испытуемый агент разрушает клеточные мембраны, вызывая гибель клеток и уменьшая жизнеспособность клеток в срезах.
После инкубации удалите среду. Погрузите срезы в среду, содержащую водорастворимую соль тетразолия (WST-1) и реагент для электронной связи.
инкубировать. В метаболически активных клетках электронно-транспортная система плазматической мембраны переносит электроны от внутриклеточного NADH к реагенту внеклеточного электронного взаимодействия, восстанавливая непроницаемый для клеток краситель WST-1 до стабильного, темно-желтого, водорастворимого формазана.
После инкубации встряхните планшет, чтобы равномерно распределить формазан и переложите его в многолуночную тарелку.
С помощью считывателя микропланшетов измерьте абсорбцию формазана, свидетельствующую о жизнеспособности тканей.
Снижение абсорбции формазана, зависящее от концентрации тестируемого агента, свидетельствует о снижении ж
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео