Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 5:28 мин. • July 8th, 2025
Возьмите многолуночный планшет, содержащий суспензию лейкоцитов человека. Добавьте меченые FITC патогенные грибковые споры.
Во время инкубации споры набухают и разрушают свой жесткий гидрофобный белковый слой, обнажая полисахариды клеточной стенки, распознаваемые специфическими рецепторами распознавания образов на фагоцитарных клетках.
Это связывание запускает внутриклеточные сигнальные пути, что приводит к перестройке актина и интернализации спор в фагосомах.
В зависимости от состояния активации фагоцитов некоторые споры остаются прилипшими к клеткам без интернализации.
После инкубации соберите клетки и перенесите их в свежую пробирку.
центрифуга. Повторно суспендируйте элементы в буфере и перенесите их в многолуночную пластину с V-образным дном.
Введение меченых флуорофорами анти-FITC-антител, которые связываются с экспонированными молекулами FITC на адгезивных спорах, противодействуя им.
центрифуга. Ресуспендируйте клетки в буфере и перенесите их в проточные цитометрические трубки.
Проведите проточную цитометрию для дифференциации интернализованных и адгезивных спор.
Фагоциты, содержащие интернализованные споры, проявляют сигналы FITC, в то время как клетки с адгезивными спорами
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео