Количественная оценка уровней иммунных медиаторов в слизистой оболочке человека

Разморозьте фильтровальную бумагу, содержащую впитавшуюся жидкость слизистой оболочки носа, на льду, чтобы предотвратить деградацию образца.

Жидкость содержит иммунные медиаторы, в том числе хемокины и цитокины.

Погрузите фильтровальную бумагу в буфер. Переложите содержимое в трубчатые фильтры. Центрифуга для вымывания слизистой жидкости от фильтровальной бумаги.

Добавьте отфильтрованный экстракт носа в пластину для анализа, покрытую массивом антител захвата, специфичных для медиатора.

Иммунные медиаторы связываются с соответствующими антителами.

Введите антитела для обнаружения, меченные рутениевым комплексом, которые связываются с соответствующими медиаторами.

Добавьте буфер на основе триса, содержащий трипропиламин, или ТФК.

Когда потенциал прикладывается к электродам, рутениевый комплекс и ТФК подвергаются окислению.

Образующийся радикал ТФК возбуждает рутениевый комплекс.

Возвращаясь в основное состояние, рутениевый комплекс испускает фотоны.

Измеряемая интенсивность света пропорциональна концентрации специфического иммунного медиатора в слизистой жидкости.

Для количественного определения иммунного медиатора дыхательных путей поместите на лед до 10 образцов из хранилища с отри