Анализ для количественной оценки антителоопосредованного фагоцитоза инфицированных паразитами эритроцитов

0 просмотров • 6:56 мин. • July 8th, 2025

Возьмем, к примеру, эритроциты, инфицированные Plasmodium falciparum. Пометьте ДНК паразита флуоресцентным красителем для визуализации паразита.

Инкубируйте эти зараженные паразитами эритроциты с сыворотками от лиц, подвергшихся воздействию малярии. Эти клетки отображают на своей поверхности антигены паразитов, которые прикрепляются к естественно приобретенным антителам IgG человека в сыворотках, опсонизируя клетки для фагоцитоза.

Перенесите эритроциты, инфицированные опсонизированными паразитами, в покрытую белком многолуночную пластину, содержащую суспензию моноцитов человеческого происхождения — или фагоцитарных клеток.

Во время инкубации Fc-гамма-рецепторы на моноцитах взаимодействуют с IgG-опсонизированными эритроцитами, вызывая поглощение эритроцитов в фагосомы.

После инкубации центрифугируйте планшет, чтобы предотвратить дальнейшие клеточные взаимодействия и остановить фагоцитоз.

Выбросьте надосадочную жидкость. Обрабатывают лизирующим раствором хлорида аммония, избирательно разрывая нефагоцитированные инфицированные эритроциты, не затрагивая моноциты.

Добавьте буфер, содержащий сыворотку, чтобы остановить процесс лизирования. Центрифугируйте и выбросьте надосадочную жидкост

Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео

Войти

Больше видео

Plasmodium falciparum