Метод на основе микрофлюидных чипов для экспресс-анализа хемотаксиса нейтрофилов с использованием цельной крови

К образцу цельной крови добавьте специфические комплексы антител, направленные против клеток крови, кроме нейтрофилов.

Добавьте магнитные частицы, которые связываются с антителами, связанными с комплексом клеток крови.

Перенесите иммуномагнитно помеченный образец в порт загрузки клеток микрофлюидного чипа.

Подключите магнитные диски к порту загрузки ячеек.

Магнитное поле притягивает иммуномагнитно помеченные клетки, захватывая их к боковым стенкам порта.

Нейтрофилы, будучи непомеченными, попадают в чип и попадают в ловушку в зоне стыковки клеток.

Добавьте флуоресцентно меченный раствор хемоаттрактанта и миграционную среду в предназначенные резервуары. Жидкости протекают по микрофлюидным каналам, образуя градиент концентрации.

Когда хемоаттрактант связывается с рецептором нейтрофилов, он вызывает внутриклеточные изменения, заставляя нейтрофилы реорганизовывать свой цитоскелет и удлинять псевдоподы.

Эти псевдоподы действуют как ноги, подталкивая нейтрофилы к более высоким концентрациям хемоаттрактанта — процесс, называемый хемотаксисом.

Используйте соответствующие методы микроскопии для мониторинга миграции нейтрофилов в ответ на градиент хемоаттрактанта.

Удалите деионизированную вод