Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:03 мин. • July 8th, 2025
Начните с многолуночного планшета, содержащего жидкость бронхоальвеолярного лаважа мыши, содержащую популяцию иммунных клеток, окрашенную зеленым флуоресцентным красителем для повышения жизнеспособности.
Вводите Fc-антитела для блокирования Fc-рецепторов иммунных клеток.
Добавьте коктейль из различных меченых флуорофорами антител, нацеленных на определенные клеточные маркеры. Удалите несвязанные антитела и снова суспендируйте клетки в буфере.
С помощью проточной цитометрии выявить тусклые флуоресцентные синглеты, указывающие на живые клетки.
Освещайте клетки на частоте 488 нанометров, заставляя клетки излучать красную флуоресценцию, коррелирующую с клетками, экспрессирующими CD11c.
В популяции с высоким уровнем CD11c с помощью соответствующих фильтров длины волны идентифицировать белки-маркеры MHC-II на дендритных клетках и SiglecF на макрофагах.
В популяции с низким уровнем CD11c экспрессия CD3 на Т-клетках и CD19 на В-клетках позволяет их идентифицировать.
Освещайте клетки на частоте 405 нанометров, излучая синюю флуоресценцию, обозначающую нейтрофилы, экспрессирующие CD11b.
Освещение клеток на глубине 633 нанометра возбуждает дальние красные флуорофоры на эозинофилах, экспрессир
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео