Импульсный анализ in vitro на основе дендритных клеток вакцины для индуцирования пролиферации лимфоцитов

Начните с добавления антигенов тестируемой вакцины в культуру дендритных клеток.

Дендритная клетка распознает антиген, интернализует его через рецептор-опосредованный эндоцитоз, фрагментирует его на более мелкие пептиды и переносит полученный комплекс антиген-MHC на поверхность клетки для презентации.

Совместное культивирование антигенпрезентирующих дендритных клеток с наивными Т-лимфоцитами для обеспечения взаимодействия между рецептором Т-клеток и комплексом антиген-MHC, а также их корецепторами.

Это приводит к образованию иммунологических синапсов, активирующих Т-лимфоциты через внутриклеточную сигнализацию.

Активированные Т-лимфоциты подвергаются клональной экспансии, образуя эффекторные Т-лимфоциты.

Добавьте в культуру молекулы цитокинов интерлейкина-2, или ИЛ-2, и инкубируйте. Связывание IL-2 запускает внутриклеточную сигнализацию, обеспечивая пролиферацию и выживание лимфоцитов.

Возьмите небольшой объем культуры и центрифугируйте. Выбросьте надосадочную жидкость. Ресуспендируйте клеточную гранулу антигенпрезентирующими дендритными клетками и перенесите ее в ту же лунку.

Рестимуляция антигеном увеличивает пролиферацию лимфоцитов.

Выполните последующий анализ для количественно