Анализ на основе ламинарного потока для изучения взаимодействий между лейкоцитами и эндотелиальными клетками

Начните с помещения предметного стекла с адгезивным цитокин-стимулированным эндотелиальным монослоем в проточную камеру.

Эти эндотелиальные клетки экспрессируют молекулы поверхностной адгезии, такие как селектины, и связанные с эндотелием миграционные сигналы, такие как хемокины.

Введите в проточную камеру лейкоциты, меченные флуоресцентными метками.

Когда лейкоциты протекают через эндотелиальный монослой, они взаимодействуют с активированными эндотелиальными клетками.

Селектины на эндотелиальных клетках связываются с соответствующими лигандами на лейкоцитах.

Селектин-лигандные взаимодействия являются слабыми и преходящими, что позволяет лейкоцитам катиться по эндотелиальному монослою под действием проточной среды.

Роллинг позволяет лейкоцитам взаимодействовать с хемокинами, активируя интегрины и способствуя стойкому аресту лейкоцитов.

Впоследствии лейкоциты распространяются по эндотелиальному монослою, что указывает на их потенциал для трансмиграции, важного шага в иммунном ответе.

Этот анализ помогает изучить механизм адгезии, расклеивания и трансмиграции лейкоцитов при их перфузии над эндотелиальными клетками.

Используйте один микромоляр зеленого флуоресцентного красителя для фл