Локализованная поверхностная плазмонная резонансная томография для обнаружения белковой секреции из одной клетки
Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 5:00 мин. • July 8th, 2025
Начнем со стеклянного сенсорного чипа с функционализированными золотыми наноструктурированными массивами с самоорганизующимся монослоем, содержащим карбоксильные группы.
Закрепите чип внутри микрофлюидной сборки и введите линкер для активации карбоксильных групп.
Добавьте пептидные лиганды, конъюгируя с активированными карбоксильными группами через линкеры.
Обработайте деактивирующим соединениесодержащим буфером, деактивирующим неспецифические участки связывания, и промойте буфером.
Сфокусируйте поляризованный свет на чипе. С помощью локализованной системы поверхностного плазмонного резонанса можно получить изображение решеток, проявляющихся в виде ярких квадратов на темном фоне.
Под резонансным углом электроны золота поглощают свет. Измерьте интенсивность отраженного света под соответствующим углом, чтобы сгенерировать отклик датчика.
Ввести белок-секретирующие гибридомные клетки, которые связываются с чипом и промываются.
Прикрепленные клетки выделяют белки, которые взаимодействуют с лигандами на соседней решетке.
Эти взаимодействия изменяют угол и интенсивность отраженного света, что приводит к изменению реакции сенсора, подтверждая секреторную активность клеток.
Для очистки и р
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео