Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 6:23 мин. • July 8th, 2025
Возьмите многолуночный планшет, содержащий монослой клеток млекопитающих.
Инокулируйте лунки серийными разведениями тканевых гомогенатов, содержащих вирус Зика, полученных из различных органов инфицированной мыши.
При попадании в клетки через эндоцитоз вирус размножается и отпочковывается, заражая соседние клетки.
Покрыть высоковязким раствором метилцеллюлозы, создав физический барьер, ограничивающий движение вируса.
Барьер позволяет заражать только непосредственные соседние клетки, образуя очаги инфицированных клеток, и гарантирует, что каждый очаг происходит из одной вирусной частицы, что позволяет проводить точную количественную оценку.
Фиксируют клетки и проникают в мембрану. Добавляют первичные антитела, которые проникают в клетки и взаимодействуют с вирусным антигеном.
Введите пероксидазу-конъюгированное вторичное антитело, которое связывается с первичным антителом.
Добавьте хромогенный субстрат, который преобразуется пероксидазой для создания цветных пятен, указывающих на очаги инфицированных клеток.
Подсчитайте очаги, чтобы количественно оценить титр вируса в различных органах мыши.
Достаньте гомогенизированные образцы из морозильной камеры с температурой минус 80 градусов
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео