Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:11 мин. • July 8th, 2025
Начните с многолуночного планшета, содержащего обогащенную тромбоцитами плазму. Тромбоциты экспрессируют поверхностные механорецепторные комплексы — реагируют на механические раздражители.
Механорецепторный комплекс содержит внеклеточный лиганд-связывающий домен и макрогликопептидную область, связанную с механосенсорным доменом.
Вводят антимеханорецепторные антитела, сшивающие с лиганд-связывающими доменами рецепторов на противоположных тромбоцитах.
Поместите каплю обработанной антителами плазменной суспензии между сборками вискозиметра.
Прикладывайте напряжение сдвига, имитируя механическую силу, оттягивая рецепторы, связанные с антителами, от тромбоцитов, что приводит к диссоциации области макрогликопептида из механосенсорного домена.
Это вызывает конформационные изменения в механосенсорном домене, активируя тромбоциты и приводя к экспрессии поверхностных маркеров.
Перенесите срезанную суспензию пластинчатых пластин в новую лунку в многолуночной пластине.
Ввести коктейль из меченых флуорофорами маркер-специфичных молекул, взаимодействующих с соответствующими маркерами поверхности тромбоцитов, и зафиксировать клетки фиксирующим раствором.
При проточной цитометрии отчетливые сигнал
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео