Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 2:49 мин. • July 8th, 2025
Возьмите суспензию фекалий мыши, содержащую молочнокислые бактерии, или LAB, которые продуцируют бактериоцин, антимикробный пептид, и инокулируют в предварительно подогретую селективную мягкую агаровую среду LAB.
Вылейте среду в агаровую пластину, сформировав первый слой.
Наложите второй слой агара и инкубируйте.
Первый слой избирательно способствует росту LAB, позволяя секретируемым молекулам бактериоцина диффундировать наружу из колоний в окружающую среду.
Второй слой содержит бесклеточную среду, которая обеспечивает диффузию бактериоцина и предотвращает рост колоний LAB на поверхности.
Теперь насыпьте третий слой агара, содержащий штамм, чувствительный к бактериоцину.
Бактерии, растущие в третьем слое, сталкиваются с бактериоцином, диффундирующим из нижних слоев.
Бактериоцин разрушает клеточную мембрану чувствительных бактерий, нарушая клеточный гомеостаз и приводя к гибели клеток, видимой в виде прозрачной зоны на третьем слое.
Измерьте диаметр зоны, чтобы оценить активность бактериоцина.
Для подсчета бактериоцин-продуцирующих бактериальных клеток в образцах кала переносят разведенные клетки бактериоцина-продуцента в 4 миллилитра предварительно подогретого мягкого агара MRS. Пе
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео