Анализ in vitro для количественной оценки внутриклеточного роста паразита в макрофагах

0 просмотров • 3:29 мин. • July 8th, 2025

Возьмите две микропланшеты, содержащие покровные стекла с макрофагами, полученными из костного мозга или BMM.

Добавьте метациклические промастиготы Leishmania — удлиненную жгутиковую стадию — в одну пластину и амастиготы — овальную нежгутиковую стадию — в другую.

Во время инкубации паразиты связываются с рецепторами макрофагов, запуская рецептор-опосредованный фагоцитоз.

Фагосома сливается с лизосомами и везикулами, полученными из эндоплазматического ретикулума и аппарата Гольджи, созревая в паразитофорную вакуоль.

Пониженный pH вакуоли запускает дифференцировку промастиготы в амастиготу и ее репликацию.

Промойте для удаления неукоренившихся паразитов.

Исправьте зараженные макрофаги и добавьте моющее средство, чтобы проникнуть в клетки и паразитов.

Введите флуоресцентный краситель нуклеиновой кислоты для окрашивания ядер макрофагов и паразитов.

Закрепите покровные стекла на предметных стеклах и наблюдайте под флуоресцентным микроскопом, количественно определяя более крупные ядра хозяина и окружающие их более мелкие ядра амастигота.

Сравните количество амастигот, чтобы оценить их размножение в макрофагах, первоначально инфицированных недифференцированными промастиготами и инфицирова

Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео

Войти

Больше видео

Внутриклеточный рост паразитов