Анализ с помощью точечной пластины для оценки реакций на окислительный стресс у штаммов бактерий

Обрабатывайте как пиомеланин, так и непиомеланин-продуцирующие штаммы бактерий с помощью тест-агента.

Пиомеланин, внеклеточный пигмент, обеспечивает защиту от окислительного стресса.

Тест-агент нарушает биосинтез пиомеланина, снижая его выработку.

После инкубации выполните серийное бактериальное разведение с помощью буфера, содержащего тестируемый агент или растворитель транспортного средства.

Пятнистые бактериальные разведения на агаровых пластинах с различной концентрацией перекиси водорода — окислительного стресса.

Пластины, в которых отсутствует перекись водорода, служат контрольными.

инкубировать. В контрольных пластинах бактерии образуют колонии.

В необработанном штамме, продуцирующем пиомеланин, пиомеланин защищает бактерии от окислительного повреждения, вызванного перекисью водорода, что приводит к образованию пигментированных колоний.

Тем не менее, штамм, продуцирующий пиомеланин, обработанный тест-агентом, проявляющий восстановленный пиомеланин, становится чувствительным к окислительному стрессу, что приводит к гибели бактерий.

Подсчитайте колонии.

Уменьшение количества и размера колонии при увеличении концентрации перекиси водорода у обработанных штаммов, продуцирующих п