Иммуногистохимическое окрашивание для выявления антигенов вируса бешенства

Начните с предметного стекла с фиксированным формалином, залитым парафином срезом ткани мозга мыши, инфицированной вирусом бешенства. Неподвижный участок удерживает вирусные антигены посредством сшивки белков.

Обработайте предметное стекло раствором ксилола, чтобы удалить парафин.

Погрузите предметное стекло в уменьшающуюся концентрацию этанола, чтобы регидратировать ткань, сделав ее совместимой с водными растворами.

Введите буфер, содержащий протеазу, для разрушения белковых сшивок, улучшая доступность антигена.

Погрузите в перекись водорода для блокирования эндогенных пероксидаз и нанесите блокирующий раствор для предотвращения неспецифических взаимодействий.

Вводят первичные антитела, специфичные к антигену бешенства, образуя комплексы антиген-антитела.

Добавьте биотинилированные вторичные антитела, которые связываются с первичными антителами. Инкубируют со стрептавидин-конъюгированными ферментами пероксидазой, которые взаимодействуют с биотином.

Введите пероксидазный субстрат, получив пурпурно-красный осадок.

Нанесите на ткань противостоящий ядерный краситель, а затем посыпайте ядра синим цветом.

Иммуногистохимическое изображение выявляет пурпурно-красные пятна в цитоплазме, по