Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:00 мин. • July 8th, 2025
Начните со предметного стекла, содержащего фиксированные формалином, депарафинизированные и регидратированные биопсийные срезы височной артерии с инфильтрированными иммунными клетками, включая лимфоциты и макрофаги.
Активированные макрофаги экспрессируют рецептор фолиевой кислоты бета или FR-β — маркер, связанный с заболеванием, дифференцируя макрофаги от других иммунных клеток.
Перенесите предметное стекло в предварительно нагретый буфер для извлечения поверхностных рецепторов.
Обработайте срез перекисью водорода, блокируя внутриклеточную активность пероксидазы.
Введите смесь первичных антител, нацеленных на CD3, CD68 и FR-β, которые связываются с иммунными клетками, экспрессирующими эти белки.
Добавить биотинилированные вторичные антитела, взаимодействующие с первичными антителами, и промыть.
Покрытие стрептавидин-конъюгированными ферментами, которые связываются с биотином.
Обрабатывают хромогенным субстратом, который взаимодействует с ферментами, образуя локализованные коричневые осадки.
Ввести противокраситель — гематоксилин, окрашивая ядра в синий цвет.
Микроскопически идентифицируют маленькие, круглые, окрашенные в коричневый цвет клетки как CD3-экспрессирующие лимфоциты, а б
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео