Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 2:22 мин. • July 8th, 2025
Начните со стеклянной чашки для визуализации, содержащей суспензию нейтрофилов человека — или иммунных клеток, и визуализируйте ее с помощью флуоресцентной системы визуализации.
Введите генетически модифицированные флуоресцентные конидии Aspergillus reporter conidia — или споры грибов, и делайте снимки через равные промежутки времени до 6 часов.
Споры грибов экспрессируют красные флуоресцентные белки и помечены снаружи неразлагаемыми пурпурными флуорофорами, что помогает отличать мертвые клетки от живых.
Во время инкубации нейтрофилы взаимодействуют с ассоциированными с патогенами молекулами на конидиях через рецепторы распознавания образов, способствуя их поглощению в фагосоме.
Позже фагосома сливается с ферментосодержащей лизосомой, образуя фаголизосому.
Внутри фаголизосомы активные формы кислорода и ферменты разрушают конидии.
Во время визуализации живых клеток, в начальный момент времени, интенсивная красная и пурпурная флуоресценция в фагосоме нейтрофилов указывает на присутствие живых конидий.
Со временем снижение красной флуоресценции с удержанием пурпурной флуоресценции свидетельствует о деградации конидий, подтверждая противогрибковую активность нейтрофилов.
Чтобы визуализ
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео