Анализ вирусных прикреплений для скрининга противовирусных соединений
Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 2:47 мин. • July 8th, 2025
Начните с многолуночного планшета, содержащего предварительно охлажденный монослой клеток гепатомы человека.
Обработайте тестовые лунки смесью генетически модифицированного вируса гепатита С, несущего ген люциферазы, и целевого соединения; обработайте контрольные лунки только этим вирусом.
В тестовых лунках молекулы-мишени взаимодействуют с вирусными гликопротеинами и рецепторами клеточной поверхности, предотвращая прикрепление вирусов.
Однако в контрольных лунках вирусные гликопротеины взаимодействуют с рецепторами клеточной поверхности, обеспечивая их прикрепление. Низкая температура препятствует проникновению вируса.
Удалите надосадочную жидкость, введите среду и повторно инкубируйте при оптимальной температуре, способствуя проникновению вируса.
При попадании вирус высвобождает генетический материал, инициируя синтез вирусных белков и ферментов люциферазы, которые секретируются в среду.
Перенесите люциферазосодержащий надосадочный агент и введите субстрат.
Взаимодействие фермента с субстратом дает свет пропорционально уровню люциферазы.
Более низкая интенсивность света в тестовых лунках, по сравнению с контрольными лунками, свидетельствует об противовирусных свойствах целевого с
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео