Определение роли нейтрофилоподобных клеток в чувствительности клеток лимфомы к тестируемому препарату

Возьмем многолуночный планшет, содержащий 3D-сфероидные монокультуры клеток лимфомы, раковых лейкоцитов и кокультур лимфомы и нейтрофильных клеток в матриксе базальной мембраны.

Добавьте тестовый препарат, который связывается с внутриклеточным тубулином и нарушает полимеризацию микротрубочек, в результате чего происходит клеточный апоптоз.

В кокультуре прямой контакт клеток лимфомы активирует нейтрофилоподобные клетки, индуцируя секрецию цитокинов.

Эти цитокины взаимодействуют с рецепторами клеток лимфомы, запуская нисходящие сигнальные каскады и повышая экспрессию антиапоптотических белков, способствуя выживанию клеток.

Выбросьте носители. Добавьте буфер диссоциации, чтобы нарушить клеточную адгезию.

Соскребите сфероиды и высиживайте их под перемешиванием. Переложите суспензию в пробирки и продолжайте перемешивание до образования одноклеточных суспензий.

Введите коктейль флуорофор-конъюгированных антител, который маркирует лимфому и нейтрофилоподобные клетки.

Добавьте меченный флуорофором аннексин V и йодид пропидия для маркировки апоптотических и мертвых клеток.

С помощью проточной цитометрии можно обнаружить повышенную выживаемость клеток лимфомы в кокультуре, что указывает на н