Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:37 мин. • July 8th, 2025
Обрабатывайте культуры нейронов с увеличением концентрации тестируемого токсина.
Токсин проникает в клетки и высвобождается в цитозоль.
В зависимости от своего потенциала, токсин может препятствовать слиянию везикуляров, подавляя высвобождение нейротрансмиттеров.
Замените среду буфером, содержащим определенные нейрофармакологические соединения, чтобы блокировать потенциалы нейронного действия.
Поместите чашку для культуры на электрофизиологический стол. Чтобы начать запись, соедините нейрон сома с пипеткой, содержащей записывающий электрод.
Применяйте постоянное отрицательное давление, чтобы аспирировать небольшую часть мембраны, образуя гигауплотнение, плотное уплотнение, обеспечивающее минимальные помехи во время записи.
Поддерживайте постоянное напряжение мембраны для измерения нейронных токов.
Подайте импульсы отрицательного давления, чтобы разорвать мембрану, установив прямой контакт между нейроном и пипеткой.
Записывайте токи, производимые в нейроне из-за поглощения нейротрансмиттеров, называемых mEPSC.
Снижение частоты mEPSC при повышенном воздействии токсинов свидетельствует об ингибировании высвобождения нейромедиаторов.
Разведите ботулинический нейротоксин серотипа А до 1
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео