Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:22 мин. • July 8th, 2025
Начните с пробирки, содержащей отдельные векторы для генов антител с тяжелой и легкой цепью.
Добавьте реагент для трансфекции для формирования комплексов с векторами.
Перенесите эту смесь в клетки-хозяева млекопитающих и инкубируйте для интернализации.
Добавьте агент против комков, чтобы способствовать равномерному распределению трансфицированных клеток, улучшая восстановление и рост клеток.
Добавьте антибактериально-антимикотический раствор для предотвращения загрязнения.
В клетке-хозяине векторы интегрируются в геном хозяина.
После транскрипции генов отдельные мРНК покидают ядро и подвергаются трансляции, образуя зарождающиеся цепочки антител.
Правильное складывание и модификация зарождающихся цепей дает тяжелые и легкие цепи.
Эти цепи объединяются, образуя полностью функциональные антитела, которые затем высвобождаются во внеклеточную среду.
Соберите среду и центрифугируйте. Отфильтруйте надосадочную жидкость.
Пропустите фильтрат через очистительную колонку, которая позволяет избирательно связывать антитела.
Используя элюирующий буфер, вымывайте очищенные антитела.
Выращивайте клетки CHO в 200 миллилитрах среды в длинные колбы Эрленмейера. Соедините 5 миллилитров среды CHO frees
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео